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国家标准检测蛋白质含量测定方法 牛奶中蛋白质含量测定的国标方法是什么?

作者&投稿:盍终 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
国家标准检测蛋白质含量测定方法~

蛋白质含量测定方法就是检测N元素的含量,像三聚氰胺的问题,就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。
国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法,食物中的蛋白质在催化加热条件下分解,导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫,硼酸吸收,用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸耗计算氮含量,再乘以转化系数,即蛋白质含量。
具体操作步骤如下:
1.样品处理
精确称量0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸收10-20ml液体样品(约30-40mg氮当量)。将其转移至干燥的100毫升或500毫升氮气固定瓶中,加入0.2克硫酸铜,6克硫酸钾和20毫升硫酸,轻轻摇动,在瓶口放置一个小漏斗,将瓶子倾斜石棉网上有45度角,有小孔。
加热小火后,内容物碳化,泡沫完全停止,加强火力,保持瓶内液体稍微沸腾,直至液体呈蓝绿色澄清透明,然后继续加热0.5小时。取出并冷却,小心加入20毫升水,冷却,移入100毫升容量瓶中,用少量水洗净氮气瓶,洗净液放入容量瓶中,然后用水冲洗至刻度,混匀备用。
取相同量的硫酸铜,硫酸钾和浓硫酸作为试剂进行空白试验。然而,这种方法很危险,很难在实验室中证明。大多数实验室都有一个消化器,可以一次处理16个以上的样品和一个可以自行设定温度的呼吸机。它更安全,更可操作。

2.装好定氮装置
根据附图安装氮固定装置。 在约2/3的水蒸气发生器中加入几滴甲基红指示剂和几毫升硫酸以保持水呈酸性。 添加几个玻璃珠以防止突然沸腾。 蒸汽发生瓶中的水由压力调节器加热。

3.向接收瓶内加入试剂
将10ml 2%硼酸溶液和一滴混合指示剂加入到接收瓶中,并将冷凝管的下端插入液面下。将10.0ml样品消化液从小玻璃吸收到反应室中,用10ml水洗涤小烧杯以流入反应室,并拧紧小玻璃棒玻璃塞。
将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯中,抬起玻璃塞使其缓慢流入反应室,不能立即将玻璃盖塞紧,这样容易使玻璃塞粘在样品入口处,应先用蒸馏水清洗然后盖上,并在小玻璃杯中加水以防止泄漏。
夹紧螺旋夹并开始蒸馏。蒸汽进入反应室,氨通过冷凝管进入接收瓶。蒸馏持续5分钟。移动接收瓶,使冷凝管的下端离开液体容器,然后蒸馏1分钟,然后用少量水冲洗冷凝管下端的外端。取下接收瓶,将其置于0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液中,以灰色或蓝紫色为目的地。

扩展资料
除了凯氏定氮法以外,标准的测量方法还有:
分光光度法
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,在pH4.8的乙酸钠-乙酸缓冲溶液中与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色的3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4-二氢化吡啶化合物。在波长400nm 下测定吸光度值,与标准系列比较定量,结果乘以换算系数,即为蛋白质含量。
燃烧法
样品在900~1200℃下燃烧。在燃烧过程中,产生混合气体。 诸如碳,硫和盐的干扰气体被吸收管吸收,氮氧化物被还原成氮。 形成的氮气流由热导检测器(TCD)检测。
参考资料:食品中蛋白质的测定百度百科

测量牛奶中蛋白质的含量,主要是测N元素的含量
像三聚氰胺的问题,就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的!


希望我的回答对你有帮助

①凯氏定氮法:将蛋白质转化为氨,用酸吸收后滴定
②双缩尿法:灵敏度低,多肽键+碱性Cu2+=紫色络合物,不同蛋白质的显色相似
③紫外吸收法比较灵敏,蛋白质的中的络氨酸和色氨酸残基在280nm出的光吸收
④Folin-酚试几法(lowry法):灵敏度高,磷钼酸-磷钨酸试剂被tyr和phe还原,不同蛋白质不同的颜色深浅变化不同
⑤考马斯亮蓝法(bradford法):在酸性溶液中考马斯亮蓝染料与蛋白质结合使燃料最大吸收峰位置由465nm变为595nm,溶液颜色由棕黑变为蓝色

使用凯氏定氮的方法检测蛋白质含量。
凯氏定氮法
凯氏定氮法
蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍
【GB/T
5009.5—1985】
食品中蛋白质的测定方法
本标准适用于各类食品中蛋白质的测定。
1
原理
蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
2
试剂
所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
2.1
硫酸铜。
2.2
硫酸钾。
2.3
硫酸。
2.4
2%硼酸溶液。
2.5
混合指示液:1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
2.6
40%氢氧化钠溶液。
2.7
0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。
3
仪器
定氮蒸馏装置:如图所示。
(图略)
4
操作方法
4.1
样品处理:精密称取0.2~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取10~20ml液体样品(约相当氮30~40mg),移入干燥的
100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,3g硫酸钾及20ml硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5h。取下放冷,小心加20ml
水。放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
4.2
按图装好定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
4.3
向接收瓶内加入10ml
2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻杯的棒状玻塞。将10ml
40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其缓缓流入反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min。移动接受瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。
同时吸取10.0ml试剂空白消化液按4.3操作。
4.4
计算
式中:X——样品中蛋白质的含量,%;
V1——样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
V2——试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
N——硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度;
0.014——1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;
m——样品的质量(体积),g(ml);
F——氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉与肉制品为6.25,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为
5.30。
附加说明:
本标准由全国卫生标准技术委员会食品卫生标准分委员会提出,由卫生部食品卫生监督检验所归口。
本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。

凯氏定氮法

国家现行检测牛奶中蛋白质含量的方法是GB 5009.5-2010《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》,具体的操作步骤请参见标准文本。

《国家标准检测蛋白质含量测定方法》
答:国家现行检测牛奶中蛋白质含量的方法是GB 5009.5-2010《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》,具体的操作步骤请参见标准文本。 评论 | 学明桃园 | 来自团队 食品添加剂 | 六级 采纳率69% 擅长: 生活常识 美食/烹饪 农业科学 购车养车 家居装修 2013...

《国家标准检测蛋白质含量测定方法》
答:国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法,食物中的蛋白质在催化加热条件下分解,导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫,硼酸吸收,用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸耗计算氮含量,再乘以转化系数,即蛋白质含量。具体操作步骤如下:1.样品处理 精确称量0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体...

《如何测定牛奶中蛋白质含量,要具本步骤.原理和方法,知道的说下,谢谢...》
答:V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积,mL;N—硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度;0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液 1mL 相当于氮克数;m—样品的质量(体积),g(mL);F—氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15~17.6%,按 16%计算乘以6.25即为蛋白质,花生为5.46。

《蛋白质测定凯氏定氮法》
答:从凯氏定氮原理可以知道:凯氏定氮法是将含氮有机物转变为无机氮硫酸铵来进行检测,以得到含氮量的测定值乘以一定系数得出蛋白质含量。而含氮有机物不仅仅是蛋白质,还有三聚氰胺等等。在加上食品中蛋白质含量的现行国家标准和通行测定方法是经典凯氏定氮法。这就为造假者提供了可乘之机。蛋白质中...

《蛋白质及氨基酸的测定有哪些方法?求大神帮助》
答:楼主你好: 测定蛋白质最基本的方法是定氮法,即先测定样品中的总氮量,再由总氮量计算出样品中蛋白质的含量。蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法,它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一,在国内外应用普遍。此外,双缩脉法、染料结合法、酚试剂法等也常用于蛋白质含量测定,由于方法...

《GB 6432-1986 饲料粗蛋白测定方法是什么呢?》
答:不知道,只知道现在用凯氏定氮法 一、原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。1.有机物中的胺根在强热和CuSO4...

《怎样用双缩脲法测定蛋白质?》
答:双缩脲法灵敏度较低,但操作简单快速,是生物化学领域中测定蛋白质含量的常用方法之一,也可用于豆类、油料、米谷等作物种子及肉类等样品测定。双缩脲法 1.原理 当脲(尿素)被小心地加热至150~160℃时,可由两个分子间脱去一个氨分子而生成二缩脲(也叫双缩脲)。双缩脲在碱性条件下能与硫酸铜作用...

《我们可以通过什么的方法辨别食物中含有的营养成份》
答:1、淀粉的鉴定:在试管中滴加2ml1%可溶性淀粉溶液,然后逐滴加入碘液,注意每加入一滴碘液都要振荡摇匀,并观察溶液颜色变化 2、还原性糖的鉴定:在试管中滴加2ml1%葡萄糖溶液,再加入1ml班氏试剂,摇匀后在酒精灯上均匀加热至沸腾,观察溶液颜色变化 3、蛋白质的鉴定:在试管中滴加2ml10%鸡蛋清溶液,...

《凯氏定氮法中用含氨蒸馏水,则测定结果》
答:以凯氏定氮法测定氮含量换算蛋白质的方法,是国际上通用的标准方法,操作简单,测定结果重复性和重现性都很好,广泛用于各种食品、谷物、饲料等样品的蛋白质含量测定。此法又分为常量、半微量、微量法三种。国家标准规定为半微量凯氏定氮法。凯氏定氮法 是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在...

《纯牛奶蛋白质含量》
答:牛奶中蛋白质的含量大约为2.8%~3.3%,主要是酪蛋白的成分,同时还含有一定的乳清白蛋白和乳球蛋白,还有少量的其他蛋白,例如免疫球蛋白和酶等等。牛奶营养价值比较高,同时还含有脂肪、维生素和矿物质等营养物质。平时每天适当喝一些牛奶,可以起到缓解疲劳的作用,同时还能镇静安眠、美容护肤和强壮筋骨、...

   

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